Marta Navarro, responsable de preparación de muestras del LMA
Hoy os queremos hablar de una etapa experimental imprescindible y crucial para el buen éxito de cualquier tipo de análisis que realizamos en el LMA: la preparación de muestras.
Para realizar correctamente cualquier análisis tenemos que ‘acondicionar’ previamente el material de la mejor forma, según el tipo de muestra (biológica, polimérica, composite, materiales, etc.), la información que se desea obtener, la composición de la muestra y las características del equipo que vayamos a utilizar.
Preguntas clave para una buena preparación de muestras
Veamos paso a paso las principales preguntas que tenemos que plantearnos antes de empezar a medir. Como siempre, todo depende de vuestras necesidades en el estudio.
Cómo es mi muestra
En esta fase hay que tener en cuenta el tipo de muestra con el que estamos trabajando. Tenemos que preguntarnos:
- ¿Es un tejido biológico, un cultivo celular, un polímero, un composite, una molécula orgánica o es una muestra inorgánica?
- ¿Quieres analizar el conjunto de la muestra o una parte concreta?
- ¿Cuál es su aspecto? ¿Se presenta en forma de polvo, está en fase líquida o es una pieza compacta?
- ¿Cuál es su tamaño?
- ¿Conduce electrones o es aislante?
- ¿Necesito recuperar mi nuestra tal cual la entregué o no hace falta?
Qué datos quiero obtener
En esta fase nos centramos en el tipo de información que quiero obtener. Estas podrían ser algunas de las preguntas clave:
- ¿Me interesa analizar la muestra a nivel atómico y subatómico o no es necesario?
- ¿Necesito conocer el grado de cristalinidad de la muestra?
- ¿Prefiero centrarme en visualizar su tamaño, aspecto, morfología, textura, etc.?: ¿Necesito conocer su composición química? ¿A nivel cualitativo o cuantitativo? ¿Necesito conocer el entorno químico?
- ¿Necesito ver el interior de la muestra o me sirve con visualizar su aspecto exterior?
Esquema de análisis de los materiales
Tipos de preparación de muestras
Una vez hayamos contestado a las preguntas anteriores, podemos empezar con el trabajo de preparación. Veamos algunos ejemplos.
Mi muestra es «Blanda»: biológica, orgánica, polimérica:
Deberemos adecuarla para que soporte altos voltajes, el haz de electrones y condiciones de alto vacío. La muestra para ello debe estar seca, deshidratada y, si es biológica, fijada químicamente o deberíamos utilizar un equipo que permitiese el análisis en condiciones ambientales de temperatura y humedad o que permitiese criogenizar la muestra. La utilización de un SEM ambiental, Cryo SEM, CryoTEM y AFM son equipos adecuados en estos casos. Este tipo de muestras, además, suelen presentar un bajo contraste en el microscopio electrónico, ya que están compuestas por elementos ligeros (C, N, O). Para incrementar su contraste y poder visualizarlas mejor, se emplean metales pesados que los tiñen de forma positiva o negativa.
Mi muestra es inorgánica
En general, una muestra inerte aguantará mejor el alto vacío, el calor y los altos voltajes. Por lo tanto, su análisis bajo un TEM podría requerir menos pasos de preparación respecto a una muestra orgánica y tolerar mejor el proceso de laminación previo al análisis.
En un SEM podría no necesitar recubrimiento si la muestra es metálica y conductora.
Crio-ultramicrotomo del LMA
Quiero saber más sobre la preparación de muestras
Os recordamos que todas estas indicaciones son generales, hay muchas más variables que hay que valorar. Si quieres profundizar un poco más, échale un vistazo a nuestra página sobre cómo preparar tu experimento: https://lma.unizar.es/prepara-tu-experimento/
Así que ya sabes, si quieres un análisis y tienes dudas sobre la preparación de muestras, ponte directamente en contacto con nosotros. Puedes mandarnos un correo al lma@unizar.es o llamarnos al 976 76 29 80, ¡atenderemos tu petición cuanto antes!
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